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厌氧培养--微生物厌氧培养
1.可利用厌氧产气袋法进行厌氧培养。
规格2.5L的产气袋只能将2.5L容积内的氧气*吸收,转化成二氧化碳,同理,3,5L的产气袋能吸收3.5L容积的氧气。微需要产气袋和二氧化碳产气袋亦是如此,为达到相应的氧气浓度和二氧化碳浓度,不仅容积要固定,放置的培养物数量也基本要装满,在出厂前都根据计算设定好了的,所以,培养也需要在设定的条件下进行。
厌氧培养罐有两种规格:2.5L(13.5*19.7*9.5cm,容纳12只9cm标准培养皿),配套使用1只2.5L规格的厌氧产气袋;7.0L(21.3*28.0*11.2cm,容纳42只9cm标准培养皿),配套使用3只2.5L规格的厌氧产气袋或者2只3.5L的厌氧产气袋。两种都是长方体,原厂的产气袋培养后不会产生负压,直接可以打开,所以不需要泄压孔。
2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,可以孵育。
3.厌氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今为止上*的培养厌氧菌仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作,故名。箱侧有一交换室,具有内外二门,内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门,放入交换室,关上外门进行抽气和换气(H2,CO2,N2)达到厌氧状态,然后手伸入手套把交换室内门打开,将物品移入箱内,关上内门。箱内保持厌氧状态,也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度,本身是孵箱或孵箱即附在其内,还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落,这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。