细胞培养技术是指选用各种细胞的佳生存条件对活细胞进行培养和研究,是广泛应用于生命科学领域的重要技术。
二氧化碳振荡培养箱是实验室做细胞培养时一款比较常见箱体,主要通过模拟生物体的温度、湿度、PH值等进行生物细胞的培养。 一般细胞培养液的pH在7.0-7.4之间。由于碳酸盐pH缓冲系统是一种生理pH缓冲系统,大多数培养液用它来保持稳定的pH。用粉末配制培养液时,常常需要加入一定量的碳酸氢钠。
对大多数以碳酸盐作为pH缓冲系统的培养液而言,为了维持稳定的pH,培养箱中的二氧化碳需要维持在2-10%之间,以保持培养液中溶解的二氧化碳的浓度。
同时细胞培养的器皿需要一定程度的透气,以便于气体的交换。是不是采用其他pH缓冲系统就不需要二氧化碳振荡培养箱了呢?答案是否定的!
人们发现由于空气中的二氧化碳浓度很低,如果细胞不在二氧化碳培养箱中培养,培养液中的HCO3-会被耗尽,这样会影响细胞的正常生长。所以大部分动物细胞的培养,还是需要二氧化碳培养箱。
细胞培养液中常附加其他的pH缓冲系统,比如HEPES缓冲系统,来增加pH缓冲能力。
HEPES在pH7.2-7.4之间有很强的缓冲能力,当透气的培养器皿被拿到二氧化碳培养箱外面的时候,由于空气中二氧化碳浓度很低,培养液中碳酸盐缓冲系统就会失去效果,这时候HEPES缓冲系统就能继续保持pH的稳定。
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